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第1部分

 

1. 进行PAGE 电泳时,长度完全一样的 Oligo DNA 为什么泳带不在同一位置?

2. 琼脂糖电泳后进行EB染色发现条带很弱,是Oligo DNA的量不够么?

3. 使用3%的Agarose凝胶电泳合成的 Oligo DNA 制品,为什么有很多条带?

4. 如何检测Oligo DNA的纯度?

5. 如何测定引物的OD值:

6. 需要合成多少OD的oligo?

 

第2部分

 

7. PCR 产物经克隆后测序发现引物处的碱基有错误,为什么?怎么办?

8. 三博公司的 Oligo DNA 制品包装中为什么不提供电泳照片?

9. Oligo DNA溶解后发现有少许沉淀,会影响实验结果吗?

10. Oligo DNA定量不准是怎么回事儿?

11. 测定了Oligo DNA的OD值后发现A260/A280<1.8,制品质量(纯度)合格吗?

12. 合成的引物PCR后无目的条带是什么原因

 

第3部分

 

13. Oligo DNA片段退火后不能连接到载体上是什么原因?

14. 一般的合成 Oligo DNA 的 5‘ 和 3‘ 末端有磷酸基团吗?

15. Oligo DNA 最长可以合成多少个碱基?

16. 如何提高引物的纯度?怎样才能保证 Oligo DNA 的正确性?

17. 进行蛋白表达实验数个月不成功,后经测序发现引物处有错误,怎么办?

18. 如果测序发现引物突变,是否有补偿?

 

第4部分

 

19. TaqMan 探针设计时应遵循哪些原则?

20. 淬灭基团为TAMRA或ECLIPSE的双标记荧光探针在使用上有什么不同?

21. FITC、6-FAM、5-FAM标记之间有何区别?

22. Biotin标记有三种,它们之间有何不同?

23. 进行反义 DNA (Antisense DNA) 实验时,是否要对 DNA 链全部进行 S 化修饰?

24. 如何将两条互补的单链退火形成双链?

25. 平端的 PCR 产物难以克隆,为什么?

 

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