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三博远志DNA测序订单及产品要求

一、三博远志DNA测序订单 (下载)

二、三博远志DNA测序样品的要求

 1、PCR原液

◆片断通常大于200bp;

◆提供浓度大于50ng/ul,体积大于50ul;

◆2ul电泳检测条带清晰无杂带。

2、PCR已纯化

◆PCR产物溶于超纯水中;

◆浓度大于50ng/ul,体积大于20ul;

◆电泳检测条带单一。

3、质粒要求

◆质粒浓度大于100ng/ul,体积大于20ul;

◆.建议使用相关试剂盒提取;

◆建议同时提供1ml菌液;

◆大质粒需要注明载体长度。

 4、菌液模板要求

◆说明载体的抗性,我们提供Amp 、kan、chl、tet四种抗生素;

◆对于低拷贝质粒请直接提供1ug纯化质粒;

◆提供1ml左右的过夜培养菌液,加15%灭菌甘油,于离心管中封口保存,防止交叉污染或泄漏,特别是热天路远的最好是这样处理一下以免菌死掉,但容易污染;

◆建议尽量提供穿刺培养的菌种,或用新鲜的菌装到冰盒里运输 

5、引物要求

◆.浓度大于3.2umol/l,体积大于20ul;

随机引物和兼并引物不适合测序;

◆尽可能提供引物全序列,PCR退火温度;.

◆T7、SP6、M13(+)、M13(-)、T3等通用引物我们免费提供。

三、样品类型及注意事项

 

样品类型

收费标准

注意事项

500-1000ul新鲜菌液

可以提供5ml菌液或沉淀菌体直接提取质粒

质粒

浓度要求大于100ng/ul,大于20ul(反应个数多相应增加)

建议送前鉴定浓度。建议不要溶于TE,要溶于超纯水。因为TE离子浓度很高,抑制测序反应,建议纯化后溶于15-20ul超纯水中

PCR已纯化

浓度要求大于50ng/ul20ul左右(反应个数多相应增加)

建议送前鉴定浓度。请注意我处是取2ul原液用1%琼脂糖胶鉴定,客户经常会取5ul鉴定。建议纯化后溶于15-20ul超纯水中

PCR未纯化

浓度要求大于50ng/ul,大于50ul(不宜分离相差小于150BP的多个片段)

建议送前鉴定浓度。请注意我处是取2ul原液用1%琼脂糖胶鉴定,客户经常会取5ul鉴定。如浓度过低我们会直接停止实验,通知客户重供样。

 

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